随后可以用变性聚丙烯酰胺凝胶电泳分离放射标记的探针和线性化的单链DNA。 ●在不对称PCR反应中,当一种引物浓度是另一种的20~200倍时,PCR反应严重偏向于合成只和...

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将上清移入另一新的离心管中,应特别小心,不要将聚丙烯酰胺凝胶块转移进去(使用一根拉长的巴斯德吸管效果甚佳)。 7.向聚丙烯酰胺沉淀物中再加入0.5倍体积丙烯酰胺...

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从凝胶中回收DNA参见方案8~ 10,与琼脂糖凝胶不同,聚丙烯酰胺凝胶灌制时不能加入溴化乙锭,因为此染料会影响丙烯酰胺的聚合。 但电泳后可用溴化乙锭对聚丙烯酰胺凝胶...

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在凝胶中加入变性剂尿素可以防止RNA二级结构形成,以确保RNA在凝胶中以线性形式迁移。聚丙烯酰胺凝胶灌注进两片玻璃板中间,玻璃板由聚四氟乙烯树脂或尼龙隔圈隔开。 作...

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聚丙烯酰胺凝胶电泳的用途: 在制胶前应准备玻璃板、垂直平板支架的安装、密封好得玻璃板。 1、首先用洗涤剂将玻璃板反复清洗干净,待玻璃板晾干后,再将1mm塑料薄片...

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2.制胶 确知玻璃板的大小和间隔片的厚度,可以得知所需丙烯酰胺溶液的体积(100mL不同浓度凝胶的制备,参见表2-1)。 表2-1 制备聚丙烯酰胺凝胶所用试剂的体积 ...

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甲酰胺可用于杂交反应,以解决测序凝胶中复杂的条带压缩问题,也可以如下文所述在电泳前使DNA变性。解决测序凝胶中的条带压缩问题在聚丙烯酰胺测序凝胶中含有25%~50...

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从凝胶中纯化DNA是DNA片段亚克隆过程中的关键步骤。多年以来已经发表了许多从琼脂糖和聚丙烯酰胺凝胶中回收DNA的方法。 其中许多方法可能在一定程度上有效,但是它们没...

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20.用10μL甲酰胺上样缓冲液溶解核酸沉淀,反复抽吸助溶。 21.于95'C加热样品8min,之后置于冰水浴中。立即用变性聚丙烯酰胺凝胶电泳分析引物延伸产物。已知大小末端...

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聚丙烯酰胺凝胶较琼脂糖凝胶有三个优点:①分辨率极高,可分开长度仅相差0.1%的DNA分子,即1000bp中相差lbp;②其载样量远大于琼脂糖凝胶,多达10μg的DNA可加样于...

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